活动

活动二 : 浮游生物数一数

目的：

介绍量化藻类细胞密度的不同技术。

准备物品:

- 显微镜
- 载片 / 盖片
- 细胞数算片
- 藻类培植 (建议使用品种: Chlorella sp. 绿球藻)

定量：

由于不同藻类品种的体积大小不一，所以选择一个合适的放大倍数来观察不同属种是非常重要的一环。以下的图表介绍不同藻类体积所需的放大倍数。

观察者选择微藻的量化方法根据所需的准确程度。以下介绍不同方法量化微藻。

使用显微镜量化微藻的方法

微藻量化方法	样本量(毫升)	可测量细胞数目(每公升)	准备样本需时
滴片法	0.02	50000 to 100000	1分钟
Sedgewick-Rafter cell (counting cell)	1	1000	15分钟
Palmer – Maloney cell (counting cell)	0.1	10000	15分钟


	Sedgewick-Rafter cell	Palmer – Maloney cell

方法1 – 滴片法

这是一个最简单的方法用来估计微生藻的密度。一滴海水的体积大约等如0.02毫升，如果你在一滴海水中找到一个海藻细胞，那麽海藻的密度大约等如每公升50,000个细胞。

	将采样瓶盖好并慢慢地摇动样本。用滴管把样本滴在载片上，然后放上盖片。准备好的载片可放到显微镜下观察。
在一片载片上滴一滴样本

方法2 – 细胞数算片

Sedgewick-Rafter cell细胞数算片是一个广泛被用作估量微生藻的方法，其容量是1毫升 [长50毫米；濶20毫米；高１毫米]。Sedgewick-Rafter cell细胞数算片划分为50行及20列共有1000个正方格。

每毫升的藻类细胞数目 = 已数的细胞数目 x 1000 / 已观察的格数

备注：Sedgewick-Rafter cell 能从科学仪器供应商购买，价钱大约是HK$200

注满样本

	步骤一把盖片对角地置于细胞数算片上。

	步骤二用滴管把样本注满细胞数算片内。

	步骤三慢慢地移动盖片直至整个内框完全被覆盖，数算片便会注满1亳升的样本。小心不要在片内留下气泡。

数算藻类培殖样本

请根据以上程序把同一密度的藻类样本放在显微镜下观察。尝试比较不同量化方法所得的结果。

注满样本

	步骤一把盖片对角地置于细胞数算片上。

	步骤二用滴管把样本注满细胞数算片内。

	步骤三慢慢地移动盖片直至整个内框完全被覆盖，数算片便会注满1亳升的样本。小心不要在片内留下气泡。